OECD 488:转基因啮齿动物体细胞和生殖细胞基因突变分析(Muta™小鼠)
转基因啮齿动物(TGR)突变分析可以检测体内体细胞和生殖细胞中诱导点突变和小缺失(相对于总的染色体损伤/丢失)的化学物质。TGR突变模型包含转基因报告基因,这些基因被设计为易于从体内任何组织中恢复的载体携带。在啮齿类动物中产生的突变是通过恢复和分析报告基因在缺乏报告基因的细菌宿主中的报告基因表型来测量的。
Muta™小鼠是一种转基因小鼠模型,在3号染色体的一个位点上包含多个lacZ报告基因副本。从感兴趣的组织中分离出DNA,然后将报告基因切除并插入噬菌体颗粒中。这些与既缺乏功能性lacZ基因又缺乏功能性galE基因(galE−,lacZ−)的大肠杆菌一起孵育。细菌在对galE−、lacZ−细菌有毒的选择性培养基上生长。只有带有反向突变的功能性lacZ+基因的细菌才能存活。突变频率可以通过在选择性培养基上生长的菌落数量与非选择性培养基上生长的菌落数量的比值来估计。