B16-F10:小鼠黑色素瘤模型

皮肤癌包括所有层的癌最常见的皮肤基底细胞(BCC)和鳞状细胞癌(SCC)。黑色素瘤和非黑素瘤皮肤癌(默克尔细胞癌,卡波西氏肉瘤,皮肤淋巴瘤和其他肉瘤)不太常见。所有的皮肤癌类型,黑色素瘤是一种严重的皮肤癌黑色素细胞开始,melanin-producing神经嵴细胞位于底层(皮肤的表皮的基底层)。虽然恶性BCC和SCC很少转移,但不太常见的恶性黑素瘤,另一方面,是非常积极和迅速扩散到身体的其他部位。黑色素瘤出现在许多不同的形状,大小和颜色与一组全面的预警信号。^[1]

黑色素瘤是可以治愈的,及早发现和治疗时,美国患者五年生存率大约为98%。^[2]一旦黑色素瘤侵袭性皮肤或身体的其他部位,更难以治疗,可以是致命的。美国癌症协会的估计,黑色素瘤在美国2019年的大约192310个新黑色素瘤诊断的96480例侵袭性,和大约有7230人将死于黑素瘤。黑色素瘤的利率已经迅速增长在过去的几十年里,黑素瘤是最常见的癌症之一,在年轻的成年人(尤其是年轻女性)。光肤色是黑素瘤的主要危险因素是20倍比非洲裔美国人在白人,虽然没有种族是免疫的。每个人的风险会受到几个因素的影响包括暴露于阳光、紫外线,摩尔,先前的癌症,基因和家庭因素。

治疗方案取决于阶段的疾病,肿瘤的位置和整体健康的病人,包括黑色素瘤的手术切除,免疫治疗、靶向治疗、化疗和放疗。常用的单药治疗目标在b - raf的基因突变,c - kit基因和其他异常基因。此外,化疗药物如达卡巴嗪、temozolomide, nab-paclitaxel,顺铂和卡铂都可以利用。临床试验与免疫治疗药物如- 2,ipilimumab (CTLA-4抑制剂)和pembrolizumab nivolumab (PD-1抑制剂)正在进行中,积极招募病人。这些免疫调节药物也正在测试组合设置以及新辅助方法。此外,黑色素瘤疫苗、卡介苗疫苗III期黑色素瘤,溶瘤病毒(T-VEC)被测试。^[3]新的治疗方案的重点是改善生活质量,提高生存率的晚期黑色素瘤患者。

小鼠黑色素瘤B16转椅模型是最常用的转移性黑色素瘤临床前研究模型。金博宝188网址我们已经建立了同源的B16-F10模型来评估反应immuno-oncology代理和支持疗法的新发展。生成B16-F10细胞系为10^th串行通道subclone B16转椅的父C57BL / 6小鼠肿瘤行。^[4]在体外,这些细胞成长为一个人口附着在一个上皮形态。在活的有机体内,皮内注射植入B16-F10 C57BL / 6小鼠细胞导致积极增长的肿瘤。我们增长研究表明有效增长动力学遵循一系列的接种物的倍增时间约2 - 3天(图1)。对照组研究停留20 - 25天前到达肿瘤负荷过度的安乐死的标准。这个结果在一个模型可以促进两周剂量窗口测试代理来引起他们的抗肿瘤活性。而模型本身不会导致减少体重,肿瘤结痂,溃疡是常见的临床症状与皮下和皮内B16-F10肿瘤的生长。

图1:增长动力学和体重变化C57BL / 6小鼠皮内植入B16-F10之后。

B16-F10肿瘤免疫概要

基线免疫分析B16-F10肿瘤浸润的决心流式细胞术5日未经治疗的肿瘤(300 - 500毫米³)和分析使用CompLeukocyte^TM包中。肿瘤微环境中的免疫细胞浸润,代表CD45的百分之一⁺细胞,显示不同的免疫细胞的人口主要由定义CD11b主导⁺髓细胞特征这个肿瘤模型(图2)。M2 tam (19%)、G-MDSCs(15%)和M-MDSCs(11%)表示在相对比例的区段M1 tam(1.4%)和树突细胞(4%)代表人口被降到了最低程度。淋巴人口主要是由B(7.3%)和NK细胞(4%)与最低T细胞渗透到肿瘤。的整体免疫概要文件暗示non-immunogenic模型。

图2:Immunophenotyping B16-F10模型中肿瘤的免疫细胞浸润。

B16-F10对治疗的反应

免疫调节剂:

我们已经调查了这个模型的免疫调节抗体。治疗开始时肿瘤达到~ 90毫米³检查点抑制剂anti-mPD-1或皮下B16-F10 anti-mPD-L1没有产生任何反应肿瘤(图3)。同样,起始治疗与anti-mCTLA-4或anti-mLAG-3早四天植入后不产生任何反应(图3)。最后,我们没有看到任何抗肿瘤活性B16-F10肿瘤治疗时的肿瘤坏死因子受体家族co-stimulatory受体CD137(图3 b)。immune-suppressive肿瘤微环境的天真B16-F10肿瘤,难怪单药免疫调节剂引出有限/不响应,和缺乏反应表明一个免疫寒冷的肿瘤模型,作为B16-F10报道。

图3:响应B16-F10肿瘤治疗后检查点抑制剂(A),或Anti-mCD137 (B),在C57BL / 6小鼠。

辐射:

放疗(RT)是用于黑色素瘤病人的情况不适合使用手术或拒绝手术治疗。我们评估的灵敏度皮下B16-F10肿瘤单剂量震源辐射交付的小动物从Xstrahl辐射研究平台(SARRP)。放射治疗的10,15或20 Gy显示,至少50%的抗肿瘤活性的动物,导致剂量反应肿瘤生长延迟5.9,14日或10 10.5天,15和20 Gy RT,分别表明B16-F10黑色素瘤模型对辐射(图4)。然而,即使在最高剂量治疗肿瘤测试没有导致显著的回归或任何免费的幸存者。因此,利用焦RT通过SARRP在临床环境中可金博宝188网址能是有用的在评估相结合的方法来模拟临床发展道路,包括放射治疗。

图4:响应B16-F10 C57BL / 6小鼠肿瘤病灶辐射。

治疗方案为黑色素瘤患者使用组合方法与免疫调节药物和化疗或放射治疗的潜在途径改善病人的反应。^[5]此外,联合治疗也可能有助于改变肿瘤的免疫寒冷的自然走向更多的接受/响应肿瘤微环境将变得更加适合治疗。讨论如何B16-F10模型将是有用的在你的下一个免疫治疗的研究中,科学家们联系。

引用

²SEER癌症统计事实。国家癌症研究所,国立卫生研究院(https://www.cancer.gov)。

³NCI黑色素瘤临床试验(https://www.cancer.gov/about-cancer/treatment/clinical-trials/disease/melanoma)。

⁴中村K et al。对小鼠黑素瘤细胞系使用实验转移模型的致命的恶性肿瘤。生命科学。2002年1月4日,70 (7):791 - 8。DOI: 10.1016 / s0024 - 3205 (01) 01454 - 0。