CT26-Luc:结肠癌的原位小鼠模型:对immuno-oncology研究的影响

疗法的出现,利用固有免疫系统的抗肿瘤活性与癌症表示一个范式转换,即在肿瘤治疗已永久地改变了我们如何对抗癌症的未来。

结直肠癌(CRC)是一个主要贡献者整个癌症疾病,占所有癌症病例的10%;超过一百万新病例的CRC观察2018年全世界导致超过一百万人死亡¹。临床治疗方法包括手术切除后辅助化疗的non-metastasized结肠癌靶向疗法用于转移性CRC²。最近的临床研究证明强大的免疫抑制治疗检查站的结果不可切除的患者,转移性高的微卫星不稳定性(MSI-H),或错配修复缺陷(dMMR)结直肠癌³。临床效益以至于Keytruda(单克隆抗体针对人类PD-1免疫蛋白质检查站)被批准作为CRC患者的一线治疗会议这三个标准在2020年的夏天⁴。有了这个新免疫疗法对CRC的承诺、高转化疾病的临床前模型需要评估的有效性小说immuno-oncology代理。金博宝188网址

评估治疗的效果目标免疫系统需要临床肿瘤模型和完整的免疫系统,供测试人员操作。金博宝188网址同基因的肿瘤模型表示这种策略,鼠标派生癌细胞生长形成肿瘤免疫主管老鼠的肿瘤细胞起源。我们有CT26广泛使用。WT小鼠结肠癌癌作为雌性Balb / c小鼠皮下肿瘤模型评估的有效性immuno-oncology代理——看到我们以前的工作在下面的模型聚光灯(要求提供额外的数据):

• CT26小鼠结肠癌癌聚光灯下
• 描述多个淋巴细胞增殖的子集CT26小鼠结肠癌癌模型的多色流式细胞术海报
• Immunophenotypic CT26和转录组分析和4 t1-luc Anti-mCTLA-4治疗后肿瘤模型海报

我们认识到实验和转化的局限性皮下肿瘤模型持有不同的肿瘤微环境与肿瘤从起源的器官,包括,但不限于,不同的免疫细胞侧面影响应对免疫疗法^5、6。肿瘤细胞植入的组织起源,称为原位肿瘤植入,试图纠正皮下研究的局限性,提高模型的潜在的可译性。

在这个模型中关注的焦点,我们将提供数据,展示一个健壮的和可再生的原位利用CT26小鼠肿瘤模型。WT结肠癌癌,可靠的手术方法植入和验证应对检查点抑制。

所有动物工作网站机构动物保健和使用委员会批准和执行符合指南内的实验动物保健和使用一个AAALAC-accredited程序与人道的安乐死标准预先确定的研究。

原位CT26的增长。WT-luc肿瘤

图1 -纵向监测CT26原位移植后肿瘤负担。WT-luc肿瘤碎片20 Balb / c小鼠的生物荧光成像。生物发光是植入后三天,集团意味着个人价值(A)和(B)。

肿瘤负荷是健壮和最低限度的变量。基于BLI肿瘤移植率为95%,尸体剖检,没有观察到的自然回归。劳保局派生肿瘤体积倍增时间(Td)是1.5天,平均时间在研究是21天。

常见的临床观察与疾病进展相关的腹胀由于肿瘤生长和体重增加(数据未显示)。验尸发现大初级质量在盲肠和小结节在肝脏和腹壁。主要在结肠肿瘤被观察到大血管与结肠表明集成高效的肿瘤血管招聘。我们的下一个方法是利用这个模型来确定immuno-oncology特工的功效。

在原位CT26检查点抑制。WT-luc肿瘤模型

天真的Balb / c小鼠受到CT26外科植入物。WT-luc肿瘤碎片如前所述。动物是由BLI手术后三天并根据BLI分成治疗组值。动物治疗腹腔内政府10毫克/公斤的同形像控制(克隆LTF-2) anti-mPD-L1(克隆10 f.9g2), anti-mCTLA-4(克隆9 d9)或anti-mPD-1(克隆RMP1-14),每周两次,坚持两周时间。所有抗体都从BioXCell获得(美国新罕布什尔州黎巴嫩)。动物是每周进行两次BLI测量肿瘤负荷,每周三次收集查阅,尸体剖检观察日常临床观察,和终端。

图2 -响应orthotopically CT26植入。WT-luc肿瘤检查站阻止抗体。组意味着肿瘤负荷评估BLI (A)和个体动物BLI值(中)在回应暗示疗法。

同形像管理控制抗体没有影响肿瘤负担或疾病进展(图2 a、2 b)。动物的肿瘤倍增时间管理同形像控制是2.2天,和在学习上的平均时间为28天。管理anti-mPD-L1(图2一2 c)导致一个完整的回归(没有检测到肿瘤负荷高于背景BLI值)。Anti-mCTLA-4治疗(图2一2 d)导致一天23ΔT /ΔC 0.1%和5部分回归(BLI值不到一半的治疗)的第一天在验尸没有明显疾病检测。anti-mPD-1管理局(图2一2 e)并没有导致回归或肿瘤免费的幸存者。

图3。CT26生物荧光成像。WT-luc原位肿瘤反应抑制检查站

图3——CT26生物荧光成像。WT-luc派生orthotopically植入雌性Balb / c小鼠肿瘤免疫治疗检查点封锁。动物提出了各自的代表值BLI价值为每个组。

腹部肿瘤负荷是本地化和随着时间的增加(图3)根据以往的飞行员按预期增长实验(数据未显示)。anti-mCTLA-4导致延迟性疾病治疗相关的体重增加(数据未显示)。anti-mPD-L1或anti-mCTLA-4管理提供了一个增长寿命效益同形像控制12.5和23.6天,分别。终端验尸发现没有证据表明肿瘤或其他病变1的8动物anti-mPD-L1管理,和8个里面有5个动物anti-mCTLA-4管理。

正在进行的工作是评估皮下和直视CT26之间的差异。WT植入位置对肿瘤免疫细胞渗透,组织学特征和形态、免疫激活响应检查点封锁。

综上所述,我们证明了CT26。WT-luc结肠癌原位模型为评估提供了一个健壮的平台immuno-oncology代理在一个高度转化植入位置。

我们的科学家更多地了解CT26接触。WT-luc和其他小鼠原位肿瘤模型,以及如何应用这些工具来促进你的肿瘤管道。

引用

¹布雷F,等。2018年全球癌症统计数据:GLOBOCAN估计36癌症的发病率和死亡率全球185个国家。中国2018年CA癌症;68:6,394 - 424。

²Kuipers E, et al .结肠直肠癌。Nat牧师说底漆。2015;1:15065。

³Tintelnot J,斯坦a免疫治疗结直肠癌:临床证据,挑战和新方法。世界杂志。2019;25:29,3920 - 3928。

⁴食品和药物管理局。FDA批准一线MSI-H / dMMR转移性结直肠癌患者的免疫治疗。新闻发布会上,2020年6月29日。

⁵Devaud C, et al。在不同的解剖组织网站可以雕刻和改变肿瘤微环境影响对治疗的反应。摩尔。2014;22:1,18-27。

⁶李赵X, L,斯塔尔TK,萨勃拉曼尼亚美国肿瘤位置影响免疫反应在小鼠模型的结肠癌。Oncotarget 2017;33,54775 - 54787。

⁷Fiegle E, Doleschel D, et al。双CTLA-4和PDL-1封锁抑制肿瘤生长和肝脏转移在一个高度积极的结肠癌原位小鼠模型。瘤2019;21:9,932 - 944