测量肿瘤抗原免疫有关酶联免疫斑点和FluoroSpot通过

作者:大卫•德雷伯
日期:2020年3月


增强的肿瘤抗原反应是免疫治疗的预期结果。通过急性增加抗肿瘤免疫力或长期形成免疫记忆,药物成功地促进宿主适应性免疫反应临床成功有更好的机会1

虽然众多分析可用来测量抗原特异性,这些有局限性,因为他们需要使用模型相关的试剂,转基因动物,或细胞子集净化步骤。我们的临金博宝188网址床肿瘤学有关酶联免疫斑点/ FluoroSpot提供了一个简单的和负担得起的解决方案通过分析。

ELISpot FluoroSpot使用三明治ELISA-based技术来测量细胞产生和释放可溶性的频率的目标。商业工具可用来衡量目标,包括细胞因子、趋化因子、免疫球蛋白、生长因子等。我们提供单色酶联immuno-spot分析一个目标有关酶联免疫斑点)(以及多色荧光技术分析的三个目标同时(FluoroSpot)。示意图说明FluoroSpot过程分析肿瘤特异性IFNγ和il - 4生产细胞如图1所示。

有关酶联免疫斑点/ FluoroSpot图1:过程

有关酶联免疫斑点/ FluoroSpot图1:过程

在这个技术的关注,我们展示有关酶联免疫斑点/ FluoroSpot在临床的应用immuno-oncology研究使用Hepa1-6-luc小鼠肝癌模型(图2)。为此金博宝188网址,利用FluoroSpot,我们测量肿瘤特异性免疫小鼠的外周血肿瘤轴承和显示在活的有机体内检查点抑制anti-PD-1治疗增加生产IFNγ循环肿瘤细胞的数量。此外,anti-PD-1 IFNγ/细胞因子il - 4的变化对更促炎和抗肿瘤免疫抑制反应的签名。

图2:FluoroSpot分析轴承Hepa1-6-luc肿瘤小鼠的抗肿瘤免疫。C57BL / 6小鼠建立Hepa1-6-luc肿瘤与anti-PD-1服用或同形像控制抗体。从200µl外周血白细胞与辐照Hepa1-6-luc细胞培养。)定量IFNγ的频率和il - 4分泌细胞使用CTL ImmunoSpot®S6普遍分析仪。B)的分析每个鼠标IFNγ-producing细胞频率与肿瘤体积。C)。在每个鼠标Th1 / Th2平衡评估通过测量IFNγ/ il - 4的比例产生细胞。


图2:FluoroSpot分析轴承Hepa1-6-luc肿瘤小鼠的抗肿瘤免疫。C57BL / 6小鼠建立Hepa1-6-luc肿瘤与anti-PD-1服用或同形像控制抗体。从200µl外周血白细胞与辐照Hepa1-6-luc细胞培养。)定量IFNγ的频率和il - 4分泌细胞使用CTL ImmunoSpot®S6普遍分析仪。B)的分析每个鼠标IFNγ-producing细胞频率与肿瘤体积。C)。在每个鼠标Th1 / Th2平衡评估通过测量IFNγ/ il - 4的比例产生细胞。

类似于疫苗的作用机制,越来越多的肿瘤抒发一种自适应免疫反应,包括抗体和细胞因子产生肿瘤特异性细胞1。反应的质量可以通过检查IFNγ特征和il - 4。IFNγ已经有据可查的抑制肿瘤生长,增强T细胞介导的细胞毒性。相比之下,il - 4可以促进肿瘤的生长通过各种免疫抑制效果。这种二分法通常被称为Th1 / Th2平衡2。如图2所示,anti-PD-1 tumor-responsive细胞生产IFNγ以下的频率增加体外刺激。相比之下,il - 4生产细胞的频率没有显著增加,表明检查点抑制引发了增强的抗肿瘤免疫保护。支持,老鼠频率最高的IFNγ生产存在肿瘤细胞与最小的体积。此外,anti-PD-1 IFNγ/ il - 4生产细胞的比例增加,这与最小的老鼠肿瘤最为明显。

综上所述,这个数据集有关酶联免疫斑点/ FluoroSpot演示了如何可以进一步揭示药物对肿瘤特异性免疫反应的影响。此外,由于血液的化验可以用小卷,ELISpot / FluoroSpot可以应用于纵向功效武器。因此,毒品活动机会获得机械的见解没有添加第二个采样臂的研究。更多信息有关酶联免疫斑点/ FluoroSpot如何可以应用于临床肿瘤学和immuno-oncology研究,接触的科学家Labcorp临床金博宝188网址肿瘤学。


引用

1。免疫力;52.1 (2020):36-54
2。癌症免疫学、免疫治疗;57.8 (2008):1125 - 1136。
注意:请注意动物保健和使用是根据动物福利法规在AAALAC-accredited设施IACUC协议审查和批准。

让我们开始对话

联系我们