C1498-Luc-mCherry:一种同基因急性髓系白血病(AML)模型

急性髓系白血病(AML)是成人最常见的恶性血液病，确诊后的5年生存率约为25%虽然接受标准高剂量化疗治疗的AML患者中有三分之二获得缓解，但50%的患者在缓解后复发。大多数复发发生在最初治疗的两到三年内，由于疾病的分子异质性，每个患者都有复发的风险这推动了探索新的治疗方法;特别是基于免疫的治疗，因为AML细胞表达主要组织相容性复合体(MHC)第I类和第II类，这使它们成为先天和适应性免疫反应的敏感靶点

在我们的2017年4月模特聚光灯我们提出了C1498-Luc-mCherry在金博宝188网址C57BL/6小鼠中系统性急性髓系白血病模型临床前发展的数据。该细胞系作为播散性肿瘤模型具有很高的侵袭性，基于生物发光成像(BLI)，中位肿瘤倍增时间为1.3天，中位总生存期约23天。在继续扩大免疫肿瘤应用模型的努力中，我们在这里提出了对免疫检查点封锁反应的数据。

c1498 - lucm cherry肿瘤细胞分布

细胞静脉植入后，我们发现实体瘤块会出现在包括卵巢、肝脏和脊柱在内的许多组织中。为了解C1498-Luc-mCherry肿瘤细胞在模型中的分布情况，对脾脏、骨髓和卵巢周围肿瘤进行流式细胞术检测。5只C57BL/6小鼠在植入C1498-Luc-mCherry 21天后采集样本。由于这条线是髓系恶性肿瘤，所以在卵巢周围的肿瘤中97%的细胞被分析为CD45+也就不足为奇了。通过mCherry检查，我们发现很少肿瘤细胞存在于脾脏(约2%)和骨髓(6%)中，而卵巢肿瘤中几乎78%的CD45+细胞为mCherry+(图1A)。卵巢肿瘤的H&E染色切片的组织病理学评价证实了形态相似的肿瘤细胞均质群的存在。肿瘤团块由中等多形性的肿瘤细胞组成，细胞核为圆形至长圆形，细胞质稀少，有丝分裂象较多(图1B)。

图1:C57BL/6小鼠C1498-Luc-mCherry肿瘤组成。答:肿瘤大多由mCherry+细胞组成。B:典型的h&e染色显示肿瘤细胞具有多形性核和多个有丝分裂像，原镜放大20倍。

C1498-Luc-mCherry对环磷酰胺的反应

为了证实C1498-Luc-mCherry肿瘤模型对环磷酰胺的敏感性，我们在已有疾病的小鼠中测试了用于治疗多种癌症(包括白血病)的广谱化疗药物。100mg/kg的治疗导致完全消退，90%(9/10)无肿瘤存活者(TFS，图2)。虽然我们看到缓解，但经环磷酰胺治疗的动物在尸检时显示卵巢和卵巢角增大，脾脏变色，腹膜积水。已知环磷酰胺治疗对患者的细胞毒性有几种不良副作用，包括骨髓抑制、出血性膀胱炎、感染易感性增加、不孕不育和发展其他恶性肿瘤的致癌风险。化疗的严重毒性有助于探索替代治疗方法，如免疫疗法。

图2:C57BL/6小鼠C1498-Luc-mCherry对环磷酰胺处理的反应。A和B:每只老鼠随时间的变化发出的生物发光信号。黑点线表示未治疗对照组的中位信号。

C1498-Luc-mCherry对封锁免疫检查点的反应

先前发表的数据表明，C1498模型在体内表达PD-L1，并用抗PD-L1抗体进行阻断可以提高生存率在我们的研究中，我们评估了C1498-Luc-mCherry模型对已有疾病的C57BL/6小鼠抗mpd -1和抗mpd - l1免疫检查点抑制剂的反应。抗mpd -1或抗mpd - l1治疗导致适度的肿瘤生长延迟(分别为3和5.2天，排除抗pd - l1组的异常值)，并延长寿命(分别为25%和16.7%，图3和图4)。治疗相关的体重不良影响未被观察到，然而，在所有组中，随着疾病进展，腹水积累导致腹胀。尸检显示卵巢肿块，肝脏斑驳，淋巴结肿大。

图3:C57BL/6小鼠C1498-Luc-mCherry对检查点抑制剂的反应。A, B, C和D:每只老鼠随时间的变化发出的生物发光信号。黑点线表示未治疗对照组的中位信号。彩色虚线表示各组信号中位数。

图4:C57BL/6小鼠C1498-Luc-mCherry播散模型BLI信号代表性图像

PD-1/PD-L1阻断剂对AML免疫治疗的初步临床试验报告表明，与许多形式的癌症一样，对免疫调节剂的成功反应仅在AML患者的特定亚组中可见总的来说，由于疾病进展迅速、反应窗口小以及肿瘤异质性，使用免疫检查点抑制剂单药治疗急性髓细胞白血病被认为是无效的。因此，临床重点正在转向联合治疗。由于在该模型中对抗mpd -1和抗mpd - l1的反应是最小的，它为临床前研究与这些免疫调节剂的新药物联合提供了充足的机会。金博宝188网址

联系你年代今天讨论C1498-Luc-mCherry模型是否适合您的下一个AML研究。

参考文献

^{2Barrett AJ和Le Blanc K. 2010。急性髓系白血病的免疫治疗前景。Cli。Exp Immunol。161 (2);223 - 232}

^{3.奥斯汀R，史密斯MJ和莱恩SW。2016.利用免疫系统治疗急性髓系白血病。暴击。启杂志。内科杂志。103:62 - 77<年代pan>}

^{4张林，张志刚。2009。PD-1/PD-L1相互作用抑制小鼠急性髓系白血病模型的抗肿瘤反应。血,114:1545 - 1552}