Cloudman S91 -反应性同基因黑色素瘤模型

在所有皮肤癌类型中，黑色素瘤是最严重的一种皮肤癌，虽然只占皮肤癌病例的1%左右，但死亡率却最高¹。黑色素瘤始于皮肤表皮的黑色素细胞，但一旦侵入皮肤或身体其他部位，就更难治疗，而且可能致命。

美国癌症协会(American Cancer Society)估计，2021年美国将诊断出约106110例新黑色素瘤(男性约62260例，女性约43850例)，预计约7180人将死于黑色素瘤(男性约4600例，女性约2580例)。幸运的是，如果及早发现和治疗，黑色素瘤是可以治愈的，美国患者的五年存活率估计为98%²。

在临床前，最常金博宝188网址用的同基因肿瘤模型是B16黑素瘤。如前所述，B16-F10型号对大多数免疫调节剂高度难治，对局灶辐射有中度反应。我们现在已经描述了Cloudman S91同基因肿瘤模型，作为临床前肿瘤学研究的另一个黑色素瘤模型。金博宝188网址在下面所示的例子中，动物的护理和使用是在aaalac认证的设施中根据动物福利法规进行的，并得到了IACUC协议的审查和批准。

Cloudman S91，也称为克隆M-3或S91，是一种来自雄性DBA/2小鼠的黑色素细胞来源的上皮小鼠黑色素瘤细胞系。克隆M-3是一种产生黑色素的细胞系，适合于细胞培养^3.来自缅因州巴尔港杰克逊纪念实验室(Jackson Memorial Laboratory, Bar Harbor)的雄性小鼠(C X DBA)的Cloudman S91黑色素瘤。在体外，Cloudman S91细胞生长为上皮形态的粘附群体。在体内，这些细胞在DBA/2J小鼠皮内植入比皮下植入导致生长延迟。在高腋窝植入皮下肿瘤细胞，初始接种量为1.0E+06细胞，显示出高效的生长动力学，平均倍增时间约为4天(图1)。动物在达到肿瘤负担过高的安乐死标准之前，会保持约20-25天的研究时间。

Cloudman S91肿瘤免疫谱

流式细胞术检测6例未治疗肿瘤(300-500mm)的Cloudman S91肿瘤细胞浸润的基线免疫谱^3.)并使用CompLeukocyte进行分析^TM包中。肿瘤微环境中的细胞浸润，以活CD45的百分比表示⁺细胞，显示出独特的免疫细胞群主要由未定义的CD11b主导⁺髓系细胞和M-MDSCs占很大比例(34%)(图2)。M2 TAMs(9%)和M1 TAMs(6.0%)的比例相对较高，而G-MDSCs(0.8%)和树突状细胞(0.8%)的比例最低。淋巴样细胞以NK细胞(4.3%)和NKT细胞(2.6%)为主，T细胞浸润最少。

Cloudman S91对治疗免疫调节剂的反应

检查点抑制剂免疫疗法目前用于治疗晚期黑素瘤。为了了解检查点抑制剂对Cloudman S91的疗效，用PD-1、PD-L1和CTLA-4抗体治疗患有Cloudman S91皮下肿瘤的动物。Cloudman S91肿瘤(~100mm)的治疗^3.)使用检查点抑制剂anti-mPD-1和anti-mPD-L1治疗，导致进展时间(%ITP)分别增加116和41(图3)。另一方面，anti-mCTLA-4治疗导致超过283%的ITP和20%的无肿瘤幸存者(TFS)。尽管Cloudman S91肿瘤的高髓系含量表明存在免疫抑制肿瘤微环境，但与B16-F10模型不同，单剂免疫调节剂能够诱导抗肿瘤作用，这表明肿瘤模型具有免疫应答性。

辐射

放射治疗(RT)用于患者不适合手术或拒绝手术治疗的情况。我们评估了皮下Cloudman S91肿瘤对Xstrahl小动物辐射研究平台(SARRP)提供的单剂量局灶辐射的敏感性。单个放射治疗(2.5、5、10和20 Gy)在所有动物中都显示出抗肿瘤活性，并产生剂量依赖反应(图4)。在放射治疗组中，治疗剂量导致50%至283%以上的ITP。虽然所有高剂量的处理都导致了退化，但只有20Gy导致了10%的TFS。较低剂量的放疗可用于评估联合治疗方法，以模拟包括RT在内的临床治疗方案。

化疗

如图5所示，评估化疗药物顺铂(5mg/kg)和紫杉醇(20mg/kg)对Cloudman S91的敏感性，与对照相比，ITP分别为143和121%，但没有TFS。

黑素瘤患者使用免疫调节剂和化疗或放疗的联合治疗方法是改善患者反应的潜在改变游戏规则的途径。此外，联合治疗也可能有助于改变肿瘤的免疫冷性，使肿瘤微环境更易于接受/反应，从而更易于治疗。要讨论Cloudman S91模型如何在您的下一个免疫治疗研究中发挥作用，请联系我们的科学家。

参考文献

1.https://www.cancer.org/cancer/melanoma-skin-cancer/about/key-statistics

2.https://www.skincancer.org/skin-cancer-information/melanoma/melanoma-warning-signs-and-images/

3.Yasamura Y，等。4株功能性克隆动物细胞的培养。科学学报(自然科学版)。PubMed:4288399