EMT6-Luc:体内监测转移发展和治疗效果

通过免疫疗法成功治疗乳腺癌仍然是一个挑战，但新出现的临床数据令人鼓舞。 ^3. 为了帮助开展乳腺癌免疫治疗的临金博宝188网址床前研究，我们在2018年开发了原位EMT6同基因乳腺肿瘤模型 ．

EMT6模型来源于BALB/c小鼠移植的增生性肺泡转移性肺结节。⁴随着该模型产生的进一步数据，观察到在大体尸检中可见的肺转移灶发生在40%的对照组小鼠身上。由于转移在乳腺癌患者中很常见，因此利用这一发现很重要，因此产生了荧光素酶激活的EMT6细胞系(EMT6- luc)，通过生物发光成像(BLI)监测胸部转移。在活的有机体内．在这个项目中，动物的护理和使用是在经过IACUC协议审查和批准的aaalac认证设施中根据动物福利法规进行的。

在这个重点报道中，我们介绍了EMT6-Luc模型植入乳腺脂肪垫(MFP)的初步疗效研究的数据，通过卡钳测量原发肿瘤和胸部BLI监测转移性疾病进展。EMT6和EMT6- luc模型的肿瘤生长控制如图1所示。对于亲本和EMT6-Luc模型，MFP肿瘤的中位数倍增时间为5.5天，允许2 - 3周的治疗窗口期，以评估试验药物的抗肿瘤活性。

图1。EMT6 (A)和EMT6- luc (B)原位(乳房脂肪垫)植入Balb/c雌性小鼠的个体对照生长。

为了确定EMT6-Luc对检查点封锁的反应，采用抗mpd -1或抗mpd - l1治疗携带EMT6-Luc肿瘤的小鼠。与对照相比，检查点封锁的反应温和(图2)，EMT6-Luc对抗mpd -1的反应与亲本系产生的数据相似(表1)。与亲本系相比，EMT6-Luc对抗mpd - l1的反应似乎略有改善(表1)，但在测试条件下，添加荧光素酶标记对抗肿瘤疗效的总体影响似乎微乎其微。

图2。与同型对照(A)相比，单个EMT6-Luc肿瘤体积测量显示抗mpd -1 (B)和抗mpd - l1 (C)的抗肿瘤效果。每种抗体每周两次，剂量为10 mg/kg。

表1。EMT6和EMT6- luc肿瘤模型对抗mpd -1和抗mpd - l1检查点抑制反应的差异。与未治疗的肿瘤相比，到进展终点的时间增加是基于从开始治疗到动物退出研究的天数的增加。

除了通过原发性MFP肿瘤措施评估对治疗的反应外，荧光素酶激活细胞系还可以通过评估BLI信号定位来监测胸部转移的发展在活的有机体内．胸廓信号的发展如图3所示。正如预期的那样，BLI监测提供了转移发生程度的额外粒度，以及抗mpd -1或抗mpd - l1治疗涉及转移的任何延迟。在研究期间，所有对照动物的胸部BLI信号均增加，但这些动物在大体尸检中均未发现转移性结节(数据未显示)。虽然需要进行病理评估来确认胸部信号增加的病因，但对未经治疗的动物尸检时肺结节的历史观察强烈表明，信号增加是由于转移，突出了这一终点的价值。根据这一假设，我们可以得出结论，抗mpd - l1治疗导致转移的延迟发生与原发肿瘤生长的延迟一致。值得注意的是，在该模型中转移并不会导致健康状况的下降，因为小鼠在转移影响健康之前就退出了原发肿瘤负担的研究。

图3。体内BLI成像通过胸部区域的平均肿瘤负荷(A)或代表性BLI图像(B)监测胸部信号随时间的发展。

当为免疫肿瘤学目的询问模型时，了解肿瘤中浸润的免疫细胞的组成也很重要。为此，naïve肿瘤在150- 550mm之间^3.检测浸润的T细胞和髓样细胞在总CD45⁺所有肿瘤的髓系间室均匀分布在M2巨噬细胞、单核细胞MDSCs和粒细胞MDSCs之间。M1巨噬细胞浸润相对低于其他髓系来源细胞，EMT6- luc肿瘤中浸润略高于EMT6肿瘤。CD4细胞的浸润⁺和CD8⁺EMT6和EMT6- luc肿瘤中T细胞数量极少，但一致，EMT6- luc肿瘤中NK细胞略有升高。这种组合提示免疫抑制微环境，这可能有助于解释免疫治疗方案的有限反应。

图4。淋巴(A)和髓系(B)免疫细胞在naïve EMT6和EMT6- luc肿瘤中的分布。

EMT6-Luc小鼠乳腺癌模型具有良好的免疫特性，它利用了完整的小鼠免疫系统，是免疫肿瘤学领域的一个强大工具。这些数据支持使用EMT6-Luc模型作为一种可靠的临床前免疫肿瘤模型，用于评估原发性肿瘤生长和远端胸部转移的形成。金博宝188网址

请联系我们，与我们的科学家讨论如何将EMT6-Luc，或我们的其他同基因模型之一，用于您的下一个免疫肿瘤学研究。

参考文献

¹《美国癌症协会:癌症事实与统计》美国癌症协会|癌症事实与统计, cancerstatisticscenter.cancer.org/ ? _ga = 2.5394928.293340281.1606765768-996476487.1605734560。

²霍瑞德N, Noone AM, Krapcho M, Miller D, Brest A, Yu M, Ruhl J, Tatalovich Z, Mariotto A, Lewis DR, Chen HS, Feuer EJ, Cronin KA(编)。SEER癌症统计评论，1975-2017，国家癌症研究所。马里兰州贝塞斯达,https://seer.cancer.gov/csr/1975_2017/根据2019年11月提交的SEER数据，于2020年4月发布在SEER网站上。

^3.Leal JHS和McArthur H.乳腺癌免疫治疗:从生物学到当前临床应用。欧元。中华医学杂志，2020;5(2): 113 - 124。

⁴罗克韦尔SC,卡拉曼RF, Fajardo, LF。连续移植小鼠乳腺肿瘤及其组织培养适应衍生物的特性。j .国家的。可以。本月。, 1972;49(3): 735 - 749。