Hepa 1-6:肝细胞癌的小鼠模型

肝细胞癌(HCC)是一种侵袭性恶性肿瘤，其发病率逐渐增加，影响全球100万人，目前是全球癌症相关死亡的第三大原因。^[1,2]由于乙型和丙型肝炎病毒的高度流行，HCC的患病率在亚洲和非洲最高，这两种病毒极易导致慢性肝病和随后的HCC的发展。^[1]

在西方人群中，丙型肝炎、酒精性肝硬化和非酒精性脂肪性肝炎(NASH)是主要的潜在原因。虽然早期HCC的治疗方法包括手术切除、肝移植、化疗/射频栓塞和射频消融，但晚期HCC的治疗标准是靶向治疗(索拉非尼和瑞格雷非尼)、放疗和化疗(阿霉素、5-FU和顺铂)。^[3]许多无法切除或晚期HCC的临床试验正在进行中，采用单一或联合免疫治疗、单克隆抗体或溶瘤病毒治疗。^{(1 - 4)}这些疗法已证明肿瘤缩小和生存率提高，但治疗结果取决于既往存在的疾病，如肝炎、肝硬化或非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)。因此，越来越需要更好的治疗方案。为了在临床前平台上评估新疗法，Labcorp建立了同基因HCC模型金博宝188网址Hepa 1-6。

Hepa 1-6是一种来源于自发发生在C57L/J小鼠的BW7756肝癌肿瘤的小鼠肝癌，这与大多数现有的肝癌模型(BNL, a . 7r。1、MH-129、MH134和MH-22A)为化学转化或诱导系。在具有免疫功能的小鼠中建立的Hepa 1-6肿瘤模型为免疫治疗的临床前测试提供了一个临床相关模型。金博宝188网址

在这个模型聚光灯下，我们展示在活的有机体内Hepa 1-6肿瘤模型生长动力学数据;与检查点抑制剂单独或联合局灶放疗的反应有关。我们在其亲本C57L/J菌株(在缅因州巴尔港的杰克逊实验室有限供应)和更容易获得的组织相容性C57BL/6菌株中测试了该模型。

Hepa 1-6生长参数

生长动力学皮下结果表明，两种小鼠均成功建立了模型(图1)。肿瘤的中位倍增时间约为5-6天，且无不良体重变化(数据未显示)。这种稳定的增长速度允许三周的治疗窗口来评估抗肿瘤反应。

图1:C57L/J和C57BL/6小鼠Hepa 1-6肿瘤生长动力学。

Hepa 1-6肿瘤免疫谱

为了了解Hepa 1-6肿瘤的免疫谱，基线免疫组成被分析187bet金宝搏如图2所示。从5个未处理的Hepa 1-6肿瘤C57L/J株中培养到约750-1000mm，建立了免疫谱^3.在体积。肿瘤的CD45相对较高⁺细胞群(平均~60%)，其中t淋巴细胞(CD8⁺T细胞和CD4⁺T辅助性细胞)有中度表达(平均分别为~11%和~6%)。髓系人群以G-MDSC(平均~30%)为主，其次是M-MDSC(平均~11%)。CD8⁺肿瘤微环境中的T细胞浸润提示免疫应答或“温暖”肿瘤模型。

图2:C57L/J小鼠Hepa 1-6肿瘤免疫谱基线。

Hepa 1-6对检查点抑制剂的反应

Hepa 1-6对免疫调节剂的反应在已建立的荷瘤(平均肿瘤体积~100mm)中进行评估^3.) C57BL/6小鼠用检查点阻断抗体(抗mpd -1、抗mpd - l1和抗mctla -4)处理。对照，载体(PBS)和同型(大鼠IgG2b克隆LTF-2)显示出类似的生长动力学(图1)。单剂检查点抑制剂抗mpd -1和抗mctla -4引发了强烈的反应，导致肿瘤完全消退(CR)和100%无肿瘤存活(TFS)。抗mpd - l1治疗也在一部分动物中产生了良好的反应，导致CR和5/10 TFS(图3)。与对照动物相比，检查点抑制剂抗体治疗与任何显著的体重变化无关(数据未显示)。免疫治疗的反应强烈支持Hepa 1-6肿瘤为免疫“热”的特征。

图3:C57BL/6小鼠Hepa 1-6肿瘤对检查点抑制剂的反应。

对焦点辐射的反应

临床上，非转移性HCC患者接受一种或多种肝定向治疗(LDT)，如放射治疗(RT)或立体定向体放射治疗(SBRT)。^［5］RT可导致肿瘤缩小，并改变肿瘤微环境，使其成为有利的抑瘤环境。为了测试Hepa 1-6肿瘤对RT的反应，我们使用了小动物辐射研究平台(SARRP;Xstrahl)交付焦点束辐射前往目标地区。在C57BL/6小鼠的皮下Hepa 1-6肿瘤上测试5和10Gy的局灶辐射剂量。治疗表现出剂量依赖反应，导致>20天肿瘤生长延迟(TGD)和无肿瘤存活(分别为2/10和8/10)(图4)。5Gy剂量提供中等的单一治疗反应，延长寿命，建议用于未来的联合研究。

图4:C57BL/6小鼠Hepa 1-6肿瘤对放射治疗的反应。

Hepa 1-6对Sorafenib的反应

Sorafenib是一种多酪氨酸激酶抑制剂，可阻断Raf激酶、Src、VEGF和PDGF受体的活性，用于HCC患者的一线治疗，在Hepa 1-6肿瘤上进行了测试。治疗导致肿瘤生长延迟25.4天，并延长了总生存期，但没有TFS(图5)。这些结果与临床研究的结果相当，临床研究显示部分缓解将中位总生存期从对照组的7.9个月延长到治疗组的10.7个月。^[1]

图5:sorafenib治疗C57BL/6小鼠Hepa 1-6肿瘤反应。

这些初步数据表明，HCC的Hepa 1-6模型具有良好的免疫特性，可作为一种可靠的临床前研究金博宝188网址immuno-oncology模型。我们的数据支持该模型在研究免疫疗法药物作为单一疗法或与放疗、小分子、护理标准和其他新疗法联合使用时的使用。

请联系我们，与我们的科学家讨论如何将Hepa 1-6用于您的下一个免疫肿瘤学研究。

参考文献

^[2]王晓燕，王晓燕，王晓燕，2018。肝细胞癌的分子治疗和精准医疗。Nat Rev clinin Oncol。doi: 10.1038 / s41571 - 018 - 0073 - 4。[Epub在打印前]PMID:30061739。

^[3]品特M & Peck-Radosvljevic M. 2018。综述文章:肝细胞癌的全身治疗。2018.7月23日。doi: 10.1111 / apt.14913。[Epub印前]回顾。PMID: 30039640。

^[4]怀德曼O. 2018。肝细胞癌免疫治疗的最新进展。专家意见生物Ther。8月,18(8):905 - 910。