Pan02:胰腺癌的小鼠模型

胰腺癌是第九大最常见的癌症，也是最致命的癌症之一，最低的5年生存率为5-8%。^(1、2、3)仅在今年，美国癌症协会估计将有56770人被诊断出患有这种疾病，其中超过45750人可能无法存活。胰腺导管腺癌(PDAC)是外分泌胰腺癌最常见和最具侵袭性的形式，占死亡率与发病率相等的病例的90%。^(4、5)

在诊断时，绝大多数PDAC患者要么是局部晚期，无法切除，要么是转移性疾病。疾病的无声传播，以及只有在晚期才出现疾病特定症状，使得早期发现非常具有挑战性，并导致生存率低。可切除患者的治疗方案包括手术后一线全身化疗(吉西他滨，FOLFIRINOX，紫杉醇)或联合放化疗。对于局部晚期、不能切除的患者，该方案包括多药化疗(5-FU、奥沙利铂、伊立替康)或放化疗。^[6]由于这些治疗对胰腺癌患者的益处有限，免疫治疗药物等更新的选择现在正在临床试验中进行测试。

PDAC的特点是存在纤维化间质，低突变负担，缺乏CD8⁺T细胞浸润和免疫抑制骨髓细胞群的存在，所有这些都有助于典型的非免疫原性肿瘤特征。^[7]目前增强治疗反应的方法集中在使用放射治疗(RT)等药物增加T细胞向肿瘤的运输。在大多数实体肿瘤中，单独的RT有可能激活免疫系统，在细胞毒性死亡和释放免疫刺激信号后触发抗肿瘤免疫反应。然而，在PDAC患者中，单独高剂量RT或联合化疗药物的结果通常仍不令人满意^[8]单剂免疫疗法的临床试验表明反应率低至1-2%。^[9]目前至少有21项开放临床试验正在研究RT与其他免疫刺激药物的联合使用，这可能是治疗PDAC的一种有前途的途径，值得进一步研究。^[10]与此同时，在临床前平台中，我们正在使用Pan02小鼠PD金博宝188网址AC模型评估单一和联合疗法。Pan02是通过3-MCA(3-甲基胆蒽)化学诱导在雄性C57BL/6小鼠中建立的III级腺癌模型。^[11]在这个模型聚光灯下，我们展示在活的有机体内在同基因C57BL/6小鼠品系中测试了Pan02肿瘤模型生长动力学、对免疫调节抗体的反应、局灶性辐射以及RT与免疫调节剂联合使用的数据。

Pan02生长参数

Pan02皮下植入成功建立肿瘤，中位倍增时间为4-5天，植入后小鼠在研究中停留约30天(图1)，体重没有减轻(数据未显示)。生长动力学允许超过三周的治疗窗口来评估该模型中的抗肿瘤反应。

图2:皮下Pan02肿瘤的肿瘤免疫谱。

Pan02对单药处理的反应

胰腺癌患者最常用的化疗方法之一吉西他滨(100mg/kg, Q3Dx4)单药治疗Pan02荷瘤小鼠耐受性良好，并产生统计学意义上的肿瘤生长延迟(TGD)(图3)。

图3:Pan02对吉西他滨的反应。

鉴于PDAC临床免疫疗法的研究，我们开始评估我们的Pan02模型对各种免疫调节抗体的反应性(图4)。然而，与Pan02肿瘤的免疫抑制特征一致，该模型对检查点抑制剂抗mpd -1、抗mpd - l1和抗mctla -4以及共刺激抗体抗mcd137和抗mox40的反应极低或无反应也就不足为奇了。所有抗体每周两次，10mg/kg，共4次(图4)。

图4:Pan02对免疫调节抗体的反应。

Pan02对放射和联合治疗的反应

放射治疗通常用于PDAC患者。在我们的小鼠模型中，我们使用了小动物辐射研究平台(SARRP;Xstrahl)将单剂量局灶辐射(5Gy或10Gy)直接照射到肿瘤，我们观察到与未治疗对照组相比，剂量依赖性肿瘤生长延迟分别为9.5天和22天(图5)。

图5:Pan02对焦点辐射的响应。

为了研究RT联合检查点抑制剂的抗肿瘤作用，单剂量5Gy与抗mpd -1或抗mpd - l1抗体一起使用。未处理组和同型对照组的生长速率重叠，单剂检查点抑制剂抗mpd -1和抗mpd - l1治疗没有引起任何抗肿瘤反应。虽然单剂量5Gy RT比未治疗对照组的TGD为9.5天，但与检查点抑制剂联合使用对改善抗肿瘤反应没有显著贡献。抗mpd -1或抗pd - l1的RT分别导致TGD为13天和11.2天(图6)。

图6:Pan02对辐射和检查点抑制剂组合的反应。

Pan02模型的未来工作

研究正在评估使用多种组合来改善皮下Pan02模型治疗反应的潜力。此外，我们最近还生成了一个luciferase-enabled Pan02细胞系支持原位研究。

参考文献

²癌症统计事实。国家癌症研究所。(https://www.cancer.gov)。

^3.胰腺癌行动网络(https://www.pancan.org/）.

⁴甘德森j，山崎T，麦卡蒂K等。在胰腺腺癌小鼠模型中阻断成纤维细胞激活蛋白联合放射治疗。科学通报，2019,14(2):e0211117。

⁵Kabacaoglu D, Ciecielski KJ, Ruess DA和Algul H.免疫检查点抑制对胰腺导管腺癌:目前的局限性和未来的选择。免疫学前沿2018,9:1876。

⁶尚敏，郑玲。现行胰腺癌化疗标准。中国。其他。2017年,39(11):2125 - 2134。

⁷张志强，张志强，张志强等。PD-L1阻断增强胰腺导管腺癌对放疗的反应。中国生物医学工程学报，2017,29(2):379 - 379。

⁸劳佛DC，库恩PA, Kueng M等。胰腺癌:未切除和R1切除患者放化疗加大剂量放疗的可行性和结果。2018.Cureus 10(5): e2713。

⁹Javle M, Golan T和Maitra A.改变胰腺癌的进程-关注最近的翻译进展。癌症治疗评论，2016;44:17-25。

¹⁰Gajiwala S, Torgeson A, Garrido-Laguna I, Kinsey C, and Lloyd S.胰腺癌的联合免疫治疗和放射治疗策略-靶向癌症免疫周期中的多个步骤。J Gastro Oncol, 2018;9(6): 1014 - 1026。