Pan02-Luc:胰腺癌原位模型

随着发展的日益复杂免疫疗法，生物技术/制药公司现在正在寻找更相关、更准确的信息金博宝188网址临床前肿瘤模型准确预测药物反应。

虽然临床前肿金博宝188网址瘤学研究旨在在动物环境中模拟人类疾病，但研究人员面临的最大挑战是结果的可翻译性。理想的临床前肿瘤模金博宝188网址型不仅要使用特定的癌症亚型，而且还要模拟肿瘤发生所需的复杂微环境。

最近的几篇文章表明，肿瘤植入部位可以影响肿瘤动力学、血管化、结构、缺氧环境和抗肿瘤治疗敏感性等关键参数^{1 - 4}．

更常用的皮下(SC)模型具有卡尺监测肿瘤测量的优势。但在形态、血管密度、免疫细胞浸润、肿瘤微环境等方面与内脏肿瘤不同。这正是原位(OT)肿瘤模型试图捕捉的，即将肿瘤细胞系或患者来源的异种移植物植入与组织类型匹配的器官。

在免疫治疗的特定背景下，已发表的数据表明，OT肿瘤模型具有免疫抑制作用，巨噬细胞丰度更大，对某些类型的免疫治疗的敏感性低于皮下植入的相同模型²．

为了探索OT模型提供更相关的肿瘤微环境的潜力，同时也作为肿瘤的主要位置，与SC模型相比，我们使用荧光素酶使几个同基因细胞系能够促进对肿瘤进展和转移的无创监测。

在这个模型聚光灯下，我们展示了小鼠胰腺腺癌细胞系Pan02-Luc的模型发展。注:所有动物工作均经现场机构动物护理和使用委员会批准，并按照《动物保护条例》进行《实验动物护理和使用指南》在aaalac认证的项目内。人道的安乐死标准是根据体重和明确的临床观察确定的。

小鼠胰腺腺癌细胞系Pan02-Luc模型的建立

通过生物发光成像(BLI)确定，手术将Pan02-Luc细胞植入C57BL/6小鼠的胰腺头部可获得~100%的肿瘤，肿瘤稳定生长，中位倍增时间约为6天。动物的中位生存(发病率/死亡率)时间相对较长，为58天，这使得在该模型中可以进行5-6周的给药和疗效评估(图1)。肿瘤的植入和进展对体重没有任何不利影响，导致安乐死的最常见临床观察是腹胀(数据未显示)。

众所周知，胰腺癌被认为是“冷”肿瘤，对免疫疗法反应不佳。因此，我们测试了检查点抑制剂抗mpd -1单独和联合吉西他滨。

使用抗mpd -1 (10mg/kg)治疗后的疗效评估没有显示出任何有意义的应答(图2)。使用临床相关护理标准化疗药物吉西他滨(50mg/kg)治疗导致87%(7/8)的动物肿瘤完全消退(CR)， 62%(5/8)的动物被认为是BLI确定的无肿瘤存活(TFS)。治疗结束后，观察到两只动物再生。吉西他滨联合抗mpd -1与单药吉西他滨相比，没有导致任何额外的TFS。研究结束时肿瘤的代表性生物发光图像(图2C)和组织学图像(图2D)证实了吉西他滨治疗组的肿瘤消退。

图2所示。Pan02-Luc对抗mpd -1和吉西他滨治疗的反应

我们先前报道了皮下Pan02模型对免疫治疗的反应(看这个先前的模型聚光灯)．因此，通过与Luc激活的Pan02细胞系的OT数据进行比较，我们发现OT模型对抗mpd -1的反应与SC亲本Pan02模型相似。在相同剂量浓度下，OT模型对吉西他滨的反应明显高于SC模型，在SC模型中，动物表现出肿瘤生长延迟和80% PR(部分回归)，20% CR，无TFS(表1)。

表1。SC和OT Pan02肿瘤对吉西他滨治疗的疗效比较

通过流式细胞术评估免疫细胞浸润OT肿瘤，证实非免疫原性或“冷”肿瘤模型的淋巴样细胞浸润不良特征(图3A-B)。而CD8⁺和CD4⁺辅助T细胞仅占CD45的1.6%和1%⁺免疫抑制髓系细胞群以单核细胞髓系来源的抑制细胞(M-MDSCs)和M1和M2肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)为主要亚群。比较OT和SC模型的免疫谱显示，OT肿瘤中的调节性T细胞(Tregs)、自然杀伤细胞(NK)和自然杀伤T细胞(NKT)显著减少。一般来说，OT肿瘤的髓系细胞数量更多，占CD45的82%⁺而在SC模型中为68%。OT肿瘤中粒细胞mdscs和M2-TAMs显著升高，而树突状细胞则较低，表明其具有更强的抗炎免疫抑制表型。

图3。SC和OT肿瘤的流式细胞术分析

在我们手中，SC和OT模型之间的这些细微差异可能为我们所研究的治疗的反应强度提供了深入的见解。据报道，这些差异在临床上是至关重要的，因为它们影响胰腺癌患者的反应和预后的可预测性^{5 - 7。}

原位肿瘤植入以一种更好地模拟临床场景的方式提供了癌症进展和药物反应的建模。由于每个器官及其微环境都是独特的，不能通过皮下植入来复制，因此在可用的情况下使用原位模型是很重要的。

在临床金博宝188网址前肿瘤学，我们为此目的提供了几种荧光素酶激活模型。

如果您有兴趣进一步讨论这个模型，请与我们联系。

参考文献

1.Erstad DJ等，2018。胰腺癌的原位和异位小鼠模型及其对FOLFIRINOX化疗的不同反应。Dis模型机甲。7月1日;11 (7): dmm034793

2.Devaud C等人，2014。不同解剖部位的组织可以塑造和改变肿瘤微环境，从而影响对治疗的反应。摩尔。，Jan 22(1):18-27

3.盖琳MV，芬斯格拉V，范登埃恩德BJ, Bercovici N和Trautmann A, 2020。金博宝188网址临床前小鼠肿瘤模型:结构和功能的观点。eLife。，2020;9:e50740

4.邱伟及苏高华。2013.原位胰腺肿瘤小鼠模型的建立。方法Mol Biol。980:215 - 223

5.仓原H等，2011。m2极化肿瘤相关巨噬细胞在胰腺癌中的意义。《外科杂志》5月15日;167 (2): e211-e219

6.帕伦特P等，2018。胰腺导管腺癌肿瘤微环境和免疫系统之间的串扰:新治疗方法的潜在靶点。消化病学研究与实践。2018:7530619

7.Lankadasari M等，2019。驯服胰腺癌:一把双刃剑。Mol Cancer 18:48